抑郁動物模型的造模方法找不對？

實驗動物不會選擇？

不知道有哪些常用的行為學檢測方法？

「全線賦能“沃”的實驗」之實驗方法實戰教程

直播第二期將為大家帶來

《抑郁動物模型研究方法》

兩位老師為大家詳細講解

造模方法、實驗動物選擇、行為學檢測方法

涵蓋常用模型和高頻技巧，更有互動答疑

快速幫你摸清抑郁動物模型的構建

直播時間

4月26日（周二）19：00

報名方式

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直播全程免費，群內專業答疑

主題：抑郁模型構建方案

• 抑郁研究背景

• 抑郁動物模型構建

• 抑郁模型構建常用設備

講師：歐陽歡

瑞沃德資深綜合解決方案專家，主要從事運動對于神經元發育的調控機制以及在精神情感障礙疾病模型中的干預機制相關研究，核心研究結果發表于Science Advance，專注于神經科學細分領域綜合性解決方案的構建，已為上百家客戶提供專業的神經科學研究整體解決方案。

主題：抑郁模型行為學檢測方法

• 習得性無助實驗

• 懸尾實驗

• 強迫游泳實驗

• 糖水偏好實驗

• 曠場實驗

• 新奇物體探索實驗

• 新奇抑制攝食實驗

講師：徐慧玲

瑞沃德資深解決方案專家，從事神經環路和動物行為學研究相關工作多年，在慢性疼痛的神經環路研究、中樞系統的神經元形態學檢測、情緒性行為（焦慮/抑郁）的檢測、疼痛相關行為學實驗上有著豐富的經驗，致力于為客戶提供專業的動物行為學實驗解決方案。

上期不少小伙伴在直播間

提出互動問題，這次我們全部講解

一、實驗操作類

1.注射針進入目標腦區后，可以直接進行注射嗎？

“確定針頭到達目標腦區后，建議停針1min，平衡氣壓，然后就可以開啟注射程序了。”

2.顱釘植入的位置如何選擇？

“顱釘的植入位置應該盡量避免血管集中的區域及注射位點?！?/p>

3.顱骨調平的標準要求是？

“前囟和后囟高度差，Bregma左右高度差均在±0.03mm以內，即可認為與顱骨水平。”

4.小鼠腦部病毒注射實驗需要挑開硬腦膜嗎？

“使用較細的玻璃電極注射的時候需要挑開硬腦膜，因為電極尖端較為脆弱，而硬腦膜具有彈性阻力，可能會把尖端弄斷。同樣道理，在植入多通道電極的時，也需要挑開硬腦膜，防止電極尖端受損。”

5.腦部病毒注射實驗中，進針速度需要控制在？

“進針應保持勻速緩慢，推薦將全自動腦立體定位儀的速度設置在0.2-0.5mm/s。”

6.使用腦立體定位儀固定小鼠，耳桿固定位置是？

“一側耳桿移至適當位置旋緊固定，用手輕柔拖住老鼠頭部，將頭部同側枕骨大孔位置對準耳桿尖端，緩慢推動另一側耳桿至枕骨大孔處?！?/p>

7.如何判斷病毒正常注射，沒有產生針頭堵塞等現象？

“在使用注射針連接玻璃電極進行病毒注射時，可以先用空針吸取足夠的礦物油起到密封作用，再吸取一定體積的病毒，礦物油的重力作用可以保證病毒注射更為流暢。另外礦物油與病毒之間因為密度不同會出現明顯的液面分界線，我們可以用記號筆標記分界線的位置，就可以很直觀觀察到注射過程中是否存在針頭阻塞現象了?！?/p>

二、實驗耗材類

1.腦立體定位手術中，如何保護小鼠眼睛不受光源傷害？

“固定小鼠之后，可以在小鼠眼周涂抹紅霉素眼膏，起到一定的閉光和防感染作用?！?/p>

2.光遺傳與光纖記錄使用的陶瓷插針有區別嗎？

“目前常見的陶瓷插針都是使用的石英材質，自發熒光較低，所以可用于光遺傳和光纖記錄實驗。但是光纖記錄實驗更推薦使用黑色陶瓷插針，可以更好的避免環境光對于信號的干擾?！?/p>

3.固定的顱釘需要使用多大尺寸？什么材質？

“小鼠用M1.0，大鼠用M1.4，M1.2介于兩者之間，成年小鼠與幼大鼠可用，一般是不銹鋼材質。”

4.顱釘的作用是？

“如同蓋房子使用的鋼筋一樣，和牙科水泥一起可以讓植入的陶瓷插針等更加牢固?！?/p>

三、實驗技巧類

1.左右顱骨調平需要旁開多少距離？

“依據個人習慣而定，一般推薦旁開2mm左右（2-2.5mm均可）?！?/p>

2.使用牙科水泥固定，是否還需要縫合頭皮組織？

“如果備皮環節直接將注射位點上方的頭皮直接剪掉，那么直接通過牙科水泥就可以覆蓋頭部整體創面，不需要在縫合頭皮。如果是剪開頭皮進行的注射，或者牙科水泥固定的范圍較小，可以將周邊的頭皮進行縫合?！?/p>

3．病毒注射完成后，植入陶瓷插針需要重新進行顱骨調平嗎？

“在實驗中一般不需要二次調平，使用前囟點作為參考0點，那么整體操作過程中就始終保持同一個參考點即可。如果發現更換夾持器或者更換實驗器材，導致坐標有較大差別，可能是動物固定不夠牢固，需要重新檢查固定。”

4.光纖記錄實驗過程中需要全程避光嗎？

“當然不建議強光下進行實驗，使用黑色陶瓷插針及黑色陶瓷套管，將動物頭部的牙科水泥涂黑即可很好的避免環境光對于實驗信號的干擾。同時實驗環境前后需要保持一致，避免環境變化導致的數據對比問題?！?/p>

5.怎樣才能讓數據結果更加平滑？

“數據處理過程中可以選擇平滑處理功能，同時在數據采集過程中，可以改變相應的參數（如幀率，曝光等）可以讓數據呈現的更加好看?！?/p>

6.光纖記錄中進行光纖漂白的目的是？

“光纖具有一定的自發熒光，這種內部的自發熒光會掩蓋一部分微弱的信號。常用光纖根據材質分為普通光纖和低自發熒光光纖，普通光纖進行光纖記錄實驗前必須進行漂白?！?/p>

7.本底信號波動的產生原因？

“實驗環境的不穩定（溫度，光線等），動物狀態都有可能導致本底信號波動。使用黑色陶瓷插針及黑色陶瓷套管，將動物頭部的牙科水泥涂黑可以很好的避免環境光對于實驗信號的干擾?！?/p>

8.神經遞質探針信號與鈣信號有什么差別？

“常見鈣信號會呈現出快速上升和緩慢下降的特征峰形，而遞質類信號因為信號周期較長，上升或下降都可能需要較長的時間，所以信號較為平緩。但是不同腦區及種類細胞的鈣信號差別較大，具體實驗會有不同。（參考下面圖片——經典鈣信號狀態）?！?/p>

四、實驗儀器類

1.光纖記錄數據分析軟件需要單獨安裝嗎？

“不需要，R820光纖記錄軟件包含數據采集功能和數據分析功能，通過一個軟件即可實現采集和分析，簡化實驗步驟，提高實驗效率?！?/p>

2.夾持玻璃電極的注射儀器是？

“R480玻璃微電極注射泵，可用于細胞、胚胎、顱腦等納升級顯微注射?！?/p>

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