不久前，西南醫科大學附屬醫院神經外科江涌教授聯合四川大學華西醫院李濤教授和中國科學技術大學曹洋教授在“內分泌學與代謝”領域的國際頂級期刊《細胞代謝》（Cell Metabolism）上發表了題為“Astrocytic LRP1 enables mitochondria transfer to neurons and mitigates brain ischemic stroke by suppressing ARF1 lactylation ”的最新研究成果。該研究首次揭示了LRP1通過調節細胞代謝影響ARF1乳酸化修飾，進而調控星形膠質細胞-神經元細胞間線粒體轉移的作用機制。值得一提的是，這一過程可以拮抗腦缺血后神經損傷。

本期文章，我們將對話文章的第一作者周牮博士，一起了解低密度脂蛋白相關受體蛋白1（LRP1）對星形膠質細胞線粒體轉運的重要調控作用。

深究LRP1調控機制

先進設備為腦血管研究助力

隨著國家老齡化的加劇及疾病年輕化的趨勢，越來越多人處于腦血管疾病的威脅中，也給社會帶來了巨大的負擔。周牮博士主要專注于腦血管疾病相關的研究領域，旨在通過對腦血管疾病發病機制的探索，為后續開發新的治療靶點提供指導，以提升腦血管病人的存活率、改善預后及提高生活質量。

2016年，《Nature》報道了星形膠質細胞通過調控CD38環化酶活性將線粒體轉移到神經元中并可改善腦缺血后的神經元損傷。因此，星形膠質細胞-神經元細胞間的線粒體傳遞對于維持神經元細胞的有氧呼吸和能量供給具有重要的意義，靶向線粒體轉移的干預手段應用于疾病的預防與治療也展現出了較好的應用潛力。

然而，關于星形膠質細胞如何通過調節線粒體轉移來減輕腦缺血性中風的機制亟待深入地挖掘和探索。基于此，團隊結合既往關于LRP1參與神經系統的調控的相關報道，確立了LRP1對星形膠質細胞線粒體轉運的調控作用的研究課題。

團隊先是證實了LRP1調控星形膠質細胞線粒體外排的過程可能存在新的機制，進一步探究LRP1對星形膠質細胞代謝的影響，通過細胞模型探究出ARF1 K73的乳酸化修飾參與星形膠質細胞線粒體外排調控的機制。接著通過動物模型靶向星形膠質細胞干預LRP1的表達并過表達ARF1乳酸化修飾突變體，發現敲減LRP1或促進ARF1乳酸化修飾可引起腦脊液中星形膠質細胞來源的線粒體數量下降，進一步驗證該調控機制。隨后，團隊通過建立腦缺血動物模型，借助7.0T 磁共振、行為學評估和共聚焦顯微鏡證實了LRP1-ARF1 Kla(73)軸在調控星形膠質細胞線粒體轉運中的重要作用。最后，團隊通過腦卒中患者臨床樣本進一步驗證了其研究發現。

團隊在利用細胞模型進行機制探究時，不僅使用了細胞系模型，還同步采用原代細胞模型進行雙重驗證。在從動物樣本中獲取原代細胞時，瑞沃德單細胞懸液制備儀發揮了重要作用。周博表示：“之前我們手動用玻璃勻漿做出來的活率只有70%-80%，改用單懸之后活率都在90%左右，最高的一次有97%，當時還做了熒光染色，配合細胞計數儀的熒光評估，效果非常好。所以如今我們進行神經元細胞分選時，堅定地選擇使用單細胞懸液制備儀。畢竟神經元細胞相較于膠質細胞更為脆弱，而該儀器的效果讓我們非常滿意。”

在動物實驗方面，周博所在的團隊和瑞沃德的淵源頗深，可追溯到2018年。周博說：“當時我們做動物實驗一般用腹腔麻醉，后面因為一些動物倫理的原因，開始接觸吸入麻醉，就買了瑞沃德的機器。慢慢接觸多了，覺得儀器還挺好用的，就越買越多了，確實為實驗提供了不少便利。”

由于團隊成員幾乎均為神經外科醫師，他們擅長精細的顯微操作，因此在實驗方法的選擇上，即便過程繁瑣，也會盡量選取能夠滿足研究需求的造模、檢測與給藥方法。

MCAO造模以線栓法的方式來進行，評估MCAO模型腦缺血程度采用了專業的設備。周博說，“當時在美國學習的龐金偉和彭建華師兄推薦了瑞沃德的激光散斑設備，說對腦血管研究有很大的幫助，實際使用之后發現這個機器對腦缺血的研究和評價非常有用。”在進行給藥實驗時，周博又補充，“需要7天持續性對小鼠進行側腦室給藥，對比了一下，瑞沃德的緩釋泵最具有性價比。”

跳出舒適圈

探索新的實驗技術和方法

在周博整個項目歷程中，“新”是關鍵所在 ，這個字，在周博的訪談中出現了很多次。

對于周博來說，如果跟著師兄在基礎研究的模塊繼續做下去，也能做出一些成果，安安穩穩地畢業。但周博選擇了跳出自己的舒適圈，在導師的大力支持下走出瀘州的平臺，和華西醫院李濤教授團隊合作，去嘗試一些新的東西。

但新也意味著不可把握與艱辛。這項研究從立項到成果發表，前前后后經歷了大概 5 年。周博作為第一作者，承受了巨大的壓力。周博坦言一路上最大的困難，是自己的不自信和畏難情緒。不過，科研雖難，卻也是他心之所向。并且有家人的支持、導師的鼓勵以及團隊的相互配合，讓他有動力和信心堅持下去。周博的內心也在這一過程中不斷成長，抗住壓力，一路走到了現在。他感慨道：“實驗不可能一帆風順，總會遇到很多不可控的因素，實驗結果也并沒有像自己預期的那么好，只有不斷調整自己的心態和拓寬思路，才能夠尋得最終的真諦吧。”

柳暗花明又一村，碩果累累的項目的開啟，源自那輛載滿失意與傷心的大巴車。

“說起來不怕您笑話，這個立項是在大巴車上完成的。”周博笑著說，“當時我在李濤教授那學習了幾個月沒什么滿意的成果，灰溜溜地準備回瀘州了。我清晰記得，12 月 19 日那一天，從成都回瀘州的大巴上，我坐在最后一排靠窗邊，特別傷感。突然李濤教授給我打電話做了溝通，我當即就在車上一邊查文獻一邊匯報，就這樣擬定了研究的方向。”

頓了一下，周博說：“現在想起來還蠻有意思的，就像是你在井底，突然有人扔下來一根繩子，我看到了希望，抓住了，又正好把我提上來了。”

確立研究方向后，又有“新”的挑戰。“我們的實驗中要求對腦血管情況進行評價，這對于我們來說是新的東西，經過研究和反復試驗，選擇了激光散斑來做實驗比較。”“審稿人也要求我們需要提供一些更為直接的方法來評價，比如雙光子或者血管超聲，這些都是以前我們課題組沒有接觸過的新實驗，所以雖然方向上我們定好了，但在具體實驗的過程中，我們都在不斷地探索新的實驗技術和實驗方法，去創新、去突破。”

然而研究工作繁重復雜，平衡臨床與科研又成為了擺在面前的難題。一臺神經外科的手術平均時間往往會超過 4 個小時，平時還需要兼顧本科學生的臨床見習帶教，而科研工作復雜度非常高，很難用臨床的空閑時間去處理。同時，這個項目和華西醫院聯合合作，周博需要經常前往重慶和成都做實驗。他坦言，很難做到臨床和科研兼顧。

那實驗怎么進行呢？“臨床的時候就 90%以上的心思在臨床，期間一些簡單的科研工作交給課題組的其他成員完成。涉及到新的實驗，需要重點突破的時候，基本上就完全脫離臨床工作，全身心投入做科研，很難做到魚和熊掌兼得，有舍才能有得。”周博回答道。

未來，周博又將邁向何方呢？他表示之后的研究方向還是更傾向于基礎和臨床的結合。“基于臨床的數據挖掘新的靶點，通過基礎實驗進行驗證，最終再回到臨床上，應用于疾病治療中。”

生活中可以做i人

科研上要當e人

近年來，社交媒體上有個很火的MBTI性格測試。采訪之前跟周博溝通，他自稱I人。但在整個采訪過程中，我們發現他一直在不斷嘗試新的東西，向外探索，突破原有的圈子，于是打趣說：“您其實是個e人吧”。

“平時我是比較少社交的，不太喜歡參加各種聚會，以前喜歡釣魚，現在沒時間了只能在B站上看別人釣魚。少社交的好處就是可以有更多的時間和心思，沉浸在自己的世界里，靜下心來做科研，不容易受到外界的影響。”

“但是呢，”周博話鋒一轉，“江涌老師也經常教導我們，說做人可以收斂一點，但做事情一定要大膽。什么意思呢？就是搞科研一定要敢于外拓，多思考、多探索，不能局限在自己的小圈子里，畢竟現在流行多學科融合。所以我應該算是生活中的i人，科研上的e人吧。”

至于說學醫這個事，可能是爺爺胃癌離世的影響，“成為醫生”的念頭就在周博的心靈上埋下了很深的種子。那年高考填報志愿的時候，他堅定地選擇了醫學專業。

“那您會對高考生提出學醫的建議嗎？”我開始好奇。

“俗話說勸人學醫，天打雷劈。”周博大笑，“以前我覺得醫生就是萬能的，直到自己當了醫生，看著病人和家屬痛苦的時候，才知道醫生很多時候也無能為力。”

在周博看來，醫學專業比普通專業的學生培養的時間要更長，學習強度也更大。周博分享了他的經歷：“讀書的時候我們都開玩笑說，現在才是真正的三年模擬五年高考，經常都是通宵達旦地在復習準備考試。畢業之后想當臨床醫生，還要經歷三年的規范化培訓，規培之后還有兩到三年的專科醫師培訓，非常難。”

“雖然難，但看得出你很喜歡這個職業。”我說。

周博笑笑：“當你真正體驗到把病人醫治好，或者從垂死的邊緣搶救回來，看著他高高興興地出院，真的是一件非常有成就感的事情。”

直到現在，也經常有以前的病人會跟周博聯系，家有喜事的時候也會邀請他參加，分享彼此的喜悅。對于周博來說，這種成就感是超越金錢和名氣的。

“如果真要建議的話，我會建議沒有毅力和信念不堅定的人不要輕易選擇醫學專業，學醫的過程真的很辛苦，醫生也沒有想象中的光鮮亮麗。但如果你選擇學醫，成為一名真正的醫生，救死扶傷帶來的成就感也是無可比擬的。”

至于未來，周博還是希望做好自己的本職工作，成為一名造福一方的臨床大夫。“當然了，我也希望在自己有限的精力里，在科研上做出更多的突破，更好地服務臨床。”

在探索醫學的征途上，每一個腳步都鋪滿荊棘，唯有持之以恒，方可達至彼岸。

我們也祝福周博在自己熱愛的領域中繼續發光發熱，為醫學事業做出更大的貢獻。